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放射性標記是一種傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)磷酸化檢測技術(shù)。該方法利用被32P標記的ATP對細胞進行培養(yǎng)，進而使磷酸化蛋白質(zhì)通過細胞代謝被32P標記上，將提取的蛋白樣品進行凝膠電泳或色譜分離，zuì后通過放射自顯影進行檢測，實現(xiàn)蛋白質(zhì)磷酸化的鑒定。

該方法檢測靈敏度高、結(jié)果直觀。但由于絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸等的磷酸化和去磷酸化代謝速率不同，對某些磷酸化轉(zhuǎn)化速率較低的蛋白質(zhì)可能檢測不到；且存在放射性污染，對環(huán)境有一定的危害。

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